凝胶渗透色谱(GelPermeationChromatography、GPC)是1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定,而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物。(聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开)。
凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离脂溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。近年来,凝胶色谱也广泛用于小分子化合物。相对分子质量相近而化学结构不同的物质,不可能通过凝胶渗透色谱法达到*分离纯化的目的。凝胶色谱不能分辨分子大小相近的化合物,相对分子质量相差需在10%以上才能得到分离。
凝胶渗透色谱是一个复杂的体系,需要考虑的问题很多。在这里我就色谱柱使用分享给大家一些经验:
色谱柱的安装和使用:
在连接色谱柱之前,预先用即将使用的流动相体系置换以前用的流动相体系。
在连接色谱柱时,要赶走因色谱柱保存不当或长时间不用在色谱柱的进口或者出口处产生的一些气泡。
连接色谱柱要注意标示的色谱柱进出口方向。
如果分析所用的温度较高,应在较低的流速下比如0.2到0.3ml/min的流速下缓慢地升高温度,当温度达到设定温度后,再慢慢地增大流速至设定值。
如果色谱柱需要较长的时间才能平衡稳定,检查色谱柱连接处是否有漏液。